武汉戴安生物技术有限公司

大鼠单克隆抗体定制

大鼠单克隆抗体系使用大鼠进行免疫,并将其激活的B细胞与瘤细胞融合进而筛选阳性单克隆制备的高特异性抗体,与噬菌体展示技术路线相比,采用杂交瘤细胞融合的方案能够在较短的周期内为客户生产拥有高特异性、高活性和高亲和力的大鼠单抗。并可以实现任何规模的大鼠单克隆抗体生产(腹水制备或细胞培养),满足科研工作者或工业客户需求。


服务特色:

●大鼠源单抗可解决针对小鼠蛋白的抗体因抗原同源性而造成的免疫耐受问题

●蛋白质平台齐全,抗原制备经验丰富,同一个靶标大鼠免疫数量不低于4

●制备的大鼠单抗具备pM级的亲和性和高特异性,可筛选大鼠源中和抗体

●丰富的大鼠杂交瘤培养及抗体生产经验,可选择腹水制备方案或大鼠杂交瘤细胞上清培养方案制备纯化抗体,充分满足客户需求。


制备流程:

项目

说明

动物

免疫不少于4SD大鼠

弗氏佐剂

加弗氏完全佐剂进行初免,加弗氏不完全佐剂进行加强免疫

免疫原

每只大鼠每次注射100-200ug蛋白或多肽偶联物

免疫

免疫原与佐剂等量混合,采用皮下多点联合腹腔注射抗原

周期

1

采血0.02ml(获得0.02ml免疫前血清)
第一次免疫(抗原加弗氏完全佐剂)

15

第二次免疫(抗原加弗氏不完全佐剂)

30

第三次免疫(抗原加弗氏不完全佐剂)

45

第四次免疫(抗原溶于PBS或盐水)

52

采集抗血清发送客户检测内源样本检测(20uL/)

58

公司检测ELISA效价,根据ELISA检测结果,决定是正常牺牲大鼠还是调整免疫周期

65

根据公司ELISA效价结果和客户内源性结果选择合适大鼠冲击免疫,0.25mg免疫原(盐水), 腹腔注射

70

细胞融合

细胞融合

进行ELISA检测,确定抗血清效价大于1:10K的大鼠用于细胞融合

ELISA筛选

融合细胞铺96孔板培养,ELISA筛选阳性克隆

亚克隆

阳性克隆用有限稀释法进行多次亚克隆。筛选稳定的单克隆杂交瘤细胞株进行扩增培养

细胞上清内源验证

取杂交瘤细胞株的培养上清鉴定亚型并寄送给客户进行内源性实验验证,阳性细胞株冻存并计划制备腹水或培养细胞上清生产抗体

腹水制备或细胞上清培养

根据致敏动物天数和培养细胞数量,收集腹水或收集细胞上清

抗体纯化

利用protein A /G 的方式亲和纯化抗体

内源样本检测

获得的纯化后抗体寄给送客户,确保客户能用于内源实验

交付

提供给客户5mg大鼠单克隆抗体,1-3株阳性细胞株及项目服务报告

周期总计

20-22


交付结果:

(1)腹水或细胞培养亲和纯化后的大鼠单抗5mg

(2)阳性杂交瘤细胞株1-3株(如需更多,可与公司沟通)

(3)大鼠抗血清(有需要请备注)

(4)项目服务报告


注:如您需对大鼠单克隆杂交瘤细胞进行测序,中和单抗筛选,重组抗体放大生产或杂交瘤细胞上清大规模生产请与戴安生物联系, 我们会尽快安排技术人员与您对接,根据实际情况给予最优方案和报价。