噬菌体展示抗体文库服务
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服 务 简 介 | |||||||||||||||||
戴安生物利用M13丝状噬菌体展示系统,通过将单链抗体基因直接与噬菌体衣壳上的pIII蛋白的编码基因5′端融合,在噬菌体衣壳形成过程中将抗体展示在噬菌体表面 , 得到噬菌体展示的抗体文库。然后针对特定靶分子进行3-5轮亲和筛选,可以富集特异性结合靶分子的高亲和力抗体。
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服 务 内 容 |
服务步骤
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具体内容
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周期
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报价
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免疫 |
抗原制备 |
分子抗原,多肽,原核表达蛋白,真核表达蛋白质等 |
4周 |
询价 027-59325199
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免疫动物 |
可免疫兔,小鼠,羊驼,骆驼等 可用未免疫动物的 B 淋巴细胞构建天然抗体库 |
0-8 周 | ||
抗体库构建 | cDNA 合成 | 免疫细胞收集,总 RNA 提取,反转录合成 cDNA。 | 1周 | |
噬菌粒构建 | 以 cDNA 为模板 , PCR 扩增抗体基因片段,并连接至噬菌粒载体 。 | 4周 | ||
文库构建与鉴定 | 将已构建好的载体电转化至大肠杆菌菌株。 | 1周 | ||
对文库的多样性,库容量进行鉴定,保证库容量大于108,正确插 入率大于等于90% | 2周 | |||
抗体库生产 | 通过辅助噬菌体拯救获得噬菌体展示抗体库。 | 1 周 | ||
抗体富集及淘选 |
3-4 轮淘洗,获得亲和力超过 10-7M的抗体。 | 3-4 周 | ||
间接ELISA对阳性克隆反复验证 | 1 周 | |||
交付 | 阳性克隆交付 3-5 条抗体序列 ,需要更多序列可与我们联系 | |||
相关服务 | 抗体表达 | 根据客户要求,可用原核表达系统表达 scFv,Fab, VHH; 也可用 CHO/293 细胞表达完 整 IgG 分子 | ||
亲和力测定 | ||||
表位竞争实验 |
案 例 展 示 |
富集后筛选阳性纳米抗体(VHH)
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