一抗:可以特异结合底物，就是识别出我们想要检测的东西.一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。

       二抗:可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗。如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），则不需要二抗。但这样成本很高，因为一种一抗只识别一种底物。所以现在的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。

       如果一抗为多克隆抗体，由于多克隆抗体主要是IgG类，因此相应的二抗应该选择抗IgG抗体。

       对于一抗为单克隆抗体的情况，其同型(Isotype)通常会在产品信息中给出，如果你的一抗同型是小鼠IgM(Isotype：IgM)，那么相应的二抗就应该选择抗小鼠IgM。

       此外由于抗IgG抗体可以识别大多数类型的免疫球蛋白，所以在不清楚一抗同型的情况下，可以选择抗IgG的二抗。

       如果单克隆一抗为小鼠IgG的某一亚类，那么除了选择抗IgG的二抗外，还可以选择针对该亚类的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。如一抗同型为小鼠IgG1，那么可以选择抗IgG二抗或抗IgG1二抗。