养细胞的人往往谈“污”色变,明明已经小心谨慎,明明已经步步为营,恨不得戴着显微镜操作,发现污染则前功尽弃。除了在操作过程中保证严格无菌以外,做好培养器具的清洁以及预防培养基污染更是至关重要。单抗定制,抗体测序及表达,抗体定制
如何判断细胞污染? 1、培养基浑浊,可以初步判断是细菌污染。 2、培养基不浑浊,有丝状物质可以初步判断是真菌污染。 3、培养基不浑浊、没有丝状物质,但是细胞状态变差,生长变慢,在显微镜下观察可能会有小黑点,是细胞凋亡坏死,释放出大量碎片,看起来就像黑胶虫,细胞传代以后就出现细胞间黑点,细胞空泡化,很多类似凋亡、坏死的细胞,最终细胞漂浮,完全死亡。 培养环境大扫除 细胞房、培养箱、水盘、水浴锅...除了是细胞生长的温床,同时也是孕育杂菌的温床,因此养细胞之前,我们要对它们进行彻彻底底的大扫除! 单抗定制,抗体测序及表达,抗体定制
细胞培养环境除菌系列 产品特点: 1、高效清除水浴锅、培养箱水盘和废液桶中的细菌和真菌; 2、可以和自来水,纯水或灭菌水中任何一种1:500稀释使用; 3、持久抗菌,保持水浴锅、水盘中无菌状态1个星期以上; 4、非抗生素,无毒无味; 5、替代传统的硫酸铜等对于培养箱水盘易腐蚀的抗菌试剂。
产品优势: 持久抗菌:保持无菌状态1个星期以上; 绿色安全:非抗生素,无毒无味,无挥发性,彻底取代84、甲醛等毒性处理方法; 抑菌效果好:高效清除细菌,以及紫外线杀灭不了的真菌,尤其适用于梅雨季节。
产品特点: 1、 高效清除培养基中的支原体; 2、 只需要处理7天,便可以有效清除支原体; 3、 可直接加入血清、培养基中,不影响细胞的生长状态; 4、 广谱性,可替代双抗,可清除常见的革兰氏阴性和阳性菌; 5、 对细胞几乎无毒性,在超过100种细胞上进行过验证; 6、 活性成分为多肽类,支原体不会对其产生耐药性; 7、 无二次污染:最终会被缓慢降解为氨基酸,可用于大规模发酵、细胞治疗等领域。单抗定制,抗体测序及表达,抗体定制
细胞消化常用方法 酶消化法 胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。 0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。
终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。 离子螯合剂 不破坏细胞表面分子,仅与CAMs螯合,因此,如果检测细胞表面分子的话,尽量,甚至是一定不要用酶消化法。单抗定制,抗体测序及表达,抗体定制
一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。 物理法 直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。