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重组抗体高效表达秘籍

来源:戴安生物 发布时间:2022-11-14 浏览量:537次

抗体药物的发展经历了鼠源单克隆抗体、人-鼠嵌合抗体、人源化抗体和全人抗体等阶段,在抗肿瘤、抗自身免疫疾病、抗感染及生物传感器等领域都具有较好的应用前景。随着分子生物学技术的不断发展,利用基因工程重组抗体蛋白、构建抗体药物偶联物及哺乳动物细胞大规模培养等生产技术推动抗体工程进入了一个全新的时代。 重组抗体又叫基因工程抗体,是利用DNA和蛋白质工程技术,在基因水平上对免疫球蛋白分子进行适当加工改造,重新装配导入受体细胞后表达出来的抗体分子。与传统的单克隆抗体和多克隆抗体相比,重组抗体具有独特的优势,现已被广泛地应用在科学研究、免疫诊断及治疗性抗体领域。抗体测序及表达,兔单抗定制,噬菌体展示

重组抗体优势: 周期短:重组抗体在数周即可生产,而杂交瘤抗体制备需要数月; 一致性高、重复性好:重组抗体的基因是确定的,抗体生产是可控且可靠的,使得抗体的批次间差异小,重复性好; 灵敏度和特异性高:基因工程改造,利用重组技术选择的抗体更优质; 免疫原性低:无需免疫和筛选; 大规模抗体制备:可实现无动物体外生产。

重组抗体的操作必须遵循两个基本原则:1. 保持抗体亲和力和特异性,尤其不能丧失抗体特异结合抗原的能力;2. 应当降低或消除抗体的免疫原性。抗体测序及表达,兔单抗定制,噬菌体展示

重组抗体在哺乳动物细胞中的高效表达有赖于高效表达载体的构建、抗体基因序列的优化、抗体稳定细胞株的筛选、表达宿主细胞的改造及细胞培养工艺的优化等。这些问题我们都可以解决。 服务内容 1. 单克隆抗体测序: 提供杂交瘤细胞单克隆抗体的测序,周期短,实现重链轻链基因全面分析。 2. 质粒构建: 经密码子优化及基因合成,采用公司自有的哺乳表达系统pATX系列载体,优化实现高产量表达。 3. 抗体表达及纯化: 驯化成熟的293系列和自主产权的CHO-K1细胞系,实现抗体高效表达纯化。 4. 稳定细胞株: 成熟的稳定细胞株筛选平台,产量可优化到克级;长期稳定传代表达,抗体质量稳定。抗体测序及表达,兔单抗定制,噬菌体展示

优势: 1. 抗体药物研发专家和技术团队,提供个性化抗体发现整体方案,重组抗体表达量高,采用高密度转染,可实现瞬转表达量几百毫克每升,稳转可优化到克级。 2. 重组抗体表达经验丰富,已成功表达过多种形式的全长抗体(Human IgG1~4,Mouse IgG2b,Mouse IgG2a,Rabbit IgG等)和抗体片段(scFv,Fab,tandem-scfv,VHH,Fc融合蛋白,bi-specific antibody等)。 3. 一站式服务:拥有多种服务平台,在实现重组抗体设计表达和纯化的同时,进行抗体质控和活性验证,并由经验丰富的专家根据客户需求进行人源化设计验证。 4. 自主知识产权的GS敲除系统细胞系,长期稳定表达,抗体质量更稳定。 5. 周期短,可提供2~3周急速交付重组抗体表达服务。抗体测序及表达,兔单抗定制,噬菌体展示

噬菌体展示

单克隆抗体是单一种B细胞增殖分化的子代细胞(浆细胞)产生的只针对单一抗原决定簇的免疫球蛋白分子,其本质是一种抗体蛋白。与多克隆抗体不同,一种单克隆抗体只特异性结合一种抗原决定簇。单克隆抗体为新药研发、诊断试剂开发提供了重要思路,现已广泛用于畜禽传染病的诊断以及肿瘤的治疗等方面。 单克隆抗体测序 单克隆抗体测序指测定单克隆抗体的一级结构——氨基酸种类和排列顺序,即单克隆抗氨基酸序列分析。单克隆抗体的一级结构是开发新抗体药物、抗体仿制药物的理论依据,目前主要利用RT-PCR(逆转录-PCR)和基于质谱的分析方法进行分析。 RT-PCR法以遗传信息表达的中心法则为基础,通过测定单克隆抗体的基因序列,再根据遗传密码翻译成氨基酸序列。 基于质谱的分析方法将单克隆抗体利用不同的酶消化成不同的肽段,再通过质谱仪对肽段进行串联质谱分析,对质谱数据进行严谨的生物信息学分析,推断抗体的氨基端序列。抗体测序及表达,兔单抗定制,噬菌体展示

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